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臨床級凍存液

更新時(shí)間:2023-10-24

訪(fǎng)問(wèn)量:992

廠(chǎng)商性質(zhì):代理商

生產(chǎn)地址:

簡(jiǎn)要描述:
臨床級凍存液用剝離溶液收集要冷凍保存的細胞,并計數細胞數。
貨號MS-4601W SMS-4702WS規格1箱
供貨周期一個(gè)月主要用途再生醫學(xué)、干細胞庫、日本細胞培養中心CPC(Cell Processing Ce
應用領(lǐng)域醫療衛生,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合
  CP-1細胞凍存液(臨床級凍存液)
 
  ?獲得日本再生醫學(xué)等產(chǎn)品材料的資格認證
 
  1.產(chǎn)品從1992年開(kāi)始推廣應用
 
  2.在日本國內的GMP設備中生產(chǎn)制造
 
  3.進(jìn)行了非臨床實(shí)驗
 
  5.可以在-80℃的冰箱中冷凍保存
 
  6.不含動(dòng)物來(lái)源的成份
 
  7.成分公開(kāi)透明
 
  8.擁有日本原料藥注冊證(MF)

  應用實(shí)例
 

  I 懸浮細胞和貼壁細胞的冷凍方法
 

 

  II 使用CP-1HG冷凍保存/解凍造血干細胞的方法
 

 

  III。 使用CP-1HG間充質(zhì)干細胞冷凍保存/解凍方法
               冷凍保存液的制備
                 ·1.CP-1高等級,25%HSA,將介質(zhì)冷卻至4℃。
                 ·2.將CP-1高級6.8 mL,25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養基加入離心管中,并均勻混合。
                 ·3.即將使用之前,請保存在4℃下。
                細胞冷凍保存
                 ·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細胞,并計數細胞數。
                 ·2.離心除去上清液。
                 ·3.預先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養基(冷凍保存液-2的制備),均勻懸浮至1×106細胞/ mL。
                 ·4.將各1 mL放入冷凍管中,放入冷凍容器中,并在-80°C緩慢冷凍。
                 ·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
                 解凍細胞
                 ·1.事先在離心管中準備9 mL培養基。
                 ·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管,并在37°C的溫水浴中快速融化。
                 ·3.將所有解凍的細胞添加到培養基中并離心。
                 ·4.除去上清液,并添加適量的培養基。
                 ·5.在每種使用的細胞類(lèi)型的最佳條件下進(jìn)行培養。 
 
  IV 評價(jià)結果(間充質(zhì)干細胞冷凍保存)
 
  V 使用CP-1HG冷凍保存iPS / ES細胞并進(jìn)行評估
 
  Ⅰ. 懸浮細胞和貼壁細胞的冷凍方法
 
  Ⅱ.CP-1®High Grade保存/解造血干胞的方法Ⅲ.CP-1®High Grade應用于間質(zhì)胞冷保存/解
 
  冷凍保存液的制備
 
  ·1.CP-1高等級,25%HSA,將介質(zhì)冷卻至4℃。
 
  ·2.將CP-1高級6.8 mL,25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養基加入離心管中,并均勻混合。
 
  ·3.即將使用之前,請保存在4℃下。
 
  細胞冷凍保存
 
  ·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細胞,并計數細胞數。
 
  ·2.離心除去上清液。
 
  ·3.預先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養基(冷凍保存液-2的制備),
 
  均勻懸浮至1×106細胞/ mL。
 
  ·4.將各1 mL放入冷凍管中,放入冷凍容器中,并在-80°C緩慢冷凍。
 
  ·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
 
  解凍細胞
 
  ·1.事先在離心管中準備9 mL培養基。
 
  ·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管,并在37°C的溫水浴中快速融化。
 
  ·3.將所有解凍的細胞添加到培養基中并離心。
 
  ·4.除去上清液,并添加適量的培養基。
 
  ·5.在每種使用的細胞類(lèi)型的最佳條件下進(jìn)行培養。
 
  Ⅳ.價(jià)果(質(zhì)胞冷保存
 
  [目的]關(guān)于有望在將來(lái)用于再生醫學(xué)的人間充質(zhì)干細胞(hMSCs)可以冷凍保存在CP-1高等級中,并可以通過(guò)廉價(jià),方便的干冰穩定地長(cháng)期運輸嗎?
 
  [方法]將人脂肪來(lái)源的間充質(zhì)干細胞(MSC-AT)或人骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細胞(MSC-BM)冷凍在CP-1High Grade或對照中(下圖中的A)(1 x 106細胞)  / mL),并儲存在液氮罐中。 儲存在液氮罐中后,應在假定干冰運輸(-80°C·7天,-60°C·3天,60°C·7天),融化后立即存活率和第二天培養的每種條件下儲存 確認對血管的粘附率(粘附率=活細胞數/接種的活細胞數)。
 
  [結果]在所有條件下,融化后的存活率均為90%以上,未觀(guān)察到差異(下圖B)。 然而,在冷凍的hMSC作為對照中,解凍后的第二天在-60°C儲存時(shí)觀(guān)察到許多未粘附在培養箱中的死細胞,但是在CP-1中冷凍的hMSC中幾乎沒(méi)有觀(guān)察到死細胞,并且幾乎沒(méi)有觀(guān)察到所有死細胞。 連接細胞(下圖中的B和C)。
 
  [結論]由于干冰本身的溫度約為-80°C,因此我們認為在CP-1High Grade中冷凍的hMSC可以使用干冰穩定且長(cháng)期運輸。
 

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